只有了解国产分光光度计基本结构,才能更好地使用分光光度计。分光光度计的仪器组成比较简单,主要部件包括由光源、单色器、吸收池、检测器以及数据处理及记录系统等组成。
(1)光源 分光光度计中光源为仪器提供连续辐射,理想的光源应在整个紫外见光谱区可以发射连续光谱,具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用命。
由于不同的光源波长范围不同,因此,在分光光度计中在可见光区和紫外光区要使用不同的光源。目前仪器常用的光源有两种:钨丝灯、氢灯或氘灯。在可见光区、近紫外光区和近红外光区常用钨丝灯作为光源,波长范围约为320-500nm。由于钨灯的能量输出大约随工作电压的四次方而变化,为了使光源稳定,必须严格控制电压。此外,为防止在高温下工作时,钨蒸气不断在冷的灯泡内壁沉,在钨灯泡中引入了少量的碘蒸气,即碘钨灯,碘钨灯相对普通钨灯使用寿命长些。
(2)单色器 单色器是分光光度计的核心部分,分光光度计仪器的主要光学特和工作特性基本上由单色器决定。它的作用是将光源发出的连续光谱色散成各种三。分光光度计中的单色器是一个完件——棱镜或光栅外,还有人射和出射狭缝以及一组反镜。根据工作光谱范围、色散率、分辨率等性能指标的要求,可分别选用棱镜或栅分光的单色器,也可采用滤光片分光的单色器等。
国产分光光度计光片是简单、廉价的色散元件,但单色性不好,使测定精度大大受到限现一般用来消除单色器的杂散光。棱镜和光栅是目前广泛使用的色散元件。棱可以作为从紫外到中红外区的合适的色散元件,其主要缺点是色散波长的非线性布;而光栅是可以用于紫外、可见、近红外范围。光栅的主要缺点是有次级光谱扰分析,且杂散光的影响比棱镜更大,故常配滤光片以去除杂散光。
(3)吸收池 吸收池(比色皿)是盛放样品溶液的容器,具有两个相互平行、透光、厚度精的平面。主要有石英池和玻璃池两种。可见光区用玻璃池,紫外光区须采用石英池。
吸收池可能有多种规格,典型的厚度是lcm。此外,每套吸收池的质料、厚度应完全相同,以免产生误差。吸收池上的指纹、油污或壁上的沉积物都会显著地影响其透光性,因此在使用前务必彻底清洗。
(4)检测器 检测器是一种光电转换设备,将透过吸收池的光信号变成可测的电信号显示出来。常用的有光电池、光电管或光电倍增管。光电倍增管是利用二次电子发射来放大光电流,放大倍数可高达108倍,是目前应用广泛但价格较高的检测器。较**的仪器有采用二极管阵列作为检测器。
二极管阵列检测器不使用出射狭缝,在其位置上放-极管的线性阵列,则分光后不同波长的单色光同时被检测。曼响应速度快,但灵敏度不如光电倍增管,因后者具有很高的放大倍数。
(5)数据处理及记录系统 数据处理及记录系统包括放大器、A/D转换单元、微型计算机等,;理和仪器自动控制。
国产分光光度计检测器产生的光电流以某种方式转变成模拟信号,并线性地进行适度放大,放大了的模拟信号,反馈人A/D转换单元终通过微型计算机进行适当的数据处理,并通过终端装置显示或打印出被测样品的谱图。